前動力蛋白2(PK2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

酶聯(lián)免疫吸附測定法

1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學領(lǐng)域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基礎上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù) 。

中文名

酶聯(lián)免疫吸附測定法

外文名

Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA

別名

ELISA法

發(fā)現(xiàn)者

Van Weerman

原理

抗體與酶復合物結(jié)合顯色

前動力蛋白2(PK2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

試劑
（1）　包被緩沖液（PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液）:
Na2CO3 1.59克
NaHCO3　 2.93克
加蒸餾水至1000ml
（2）　洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M
KH2PO4 　0.2克
Na2HPO4·12H2O　2.9克
NaCl　8.0克
KCl　0.2克
Tween-20　0.05%　0.5ml
加蒸餾水至1000ml
（3）　稀釋液：
牛血清白蛋白（BSA） 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
（4）　終止液（3M　H2SO4）：
蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。
（5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:
0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml
0.1M檸檬酸（19.2克/L）　 24.3ml
加蒸餾水50ml。
（6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:
TMB（10mg/5ml無水乙醇）0.5ml
底物緩沖液（PH5.5）　 10ml
0.75%H2O2　 　32μl
（7）　ABTS使用液:
ABTS　0.5mg
底物緩沖液（PH5.5）　 1ml
3%H2O2　 　2μl
（8）　抗原、抗體和酶標記抗體。
（9）　正常人血清和陽性對照血清。
器材
（1）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標板）40孔或96孔，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。
（2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。